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实验中怎样染色才会达到zui佳程度
点击次数:21 发布时间:2020-01-06

    初次做凋亡,一般按照试剂盒说明书做即可,但要附上阳性对照。根据结果进行对实验过程调整。我个人认为试验过程中tunel酶反应的时间、过氧化氢的灭活时间、DAB染色时间、苏木素复染时间、PBS浸洗时间等都可以通过上次试验结果进行微调从而使试验染色达到最jia
  
  菌膜测定方法:
  1、将待测硅酸盐玻璃试管或聚苯乙烯96孔板中的菌液小心地倒掉;  
  2、用自来水柔和地冲洗,将残余的培养基及游离细胞洗去,倒置片刻,将残留的液体滴干;  
  3、加入与发酵液(是培养基吗?)等体积的结晶紫染色液,应没过细菌生物膜产生界面(生物膜产生界面在哪),轻柔振荡,染色30min;  
  4、倾去染色液,用自来水柔和地冲洗1-2次,倒置片刻,将残留的液体滴干;  
  5、加入与染色液等体积的脱色液(脱色液是什么啊?),轻柔振荡,脱色15min;
  6、将脱色液定容(如何定容?),用分光光度计测定吸光度,波长为570nm,记录结果。
  
  弧菌生长曲线: 
  1、以终浓度为102CFU/ml(如何制作一个这样浓度的细菌?)分别接种各弧菌2216E培养基中,28℃静置培养,每隔3小时取样,用分光光度计测OD值,波长为600nm。

免疫组化染色影响因素

      影响免疫组化染色质量的因素有很多,在实验中应注意组织的取材和固定,选择质量好的商品化抗体,恰当地选择和使用封闭和抗原修复手段,严格的技术操作和对照等。 
1。假阴性反应可发生在: 
1) 组织内待测抗原已被分解破坏,或抗原含量过低; 
2) 抗原被遮盖,多由于醛类固定剂的使用,使组织中的大分子蛋白借醛键形成交联而遮盖待检抗原; 
3) 抗体质量不佳或稀释度不当; 
4) 技术操作失误等。 

2.假阳性反应可发生在: 
1) 抗体与非待检抗原发生交叉反应,在使用多克隆抗体时易出现; 
2) 组织对抗体的非特异性吸附,特别是在有大片组织坏死或组织中有较多富于蛋白的液体时容易发生; 
3) 内源性过氧化酶的作用,在脾脏、骨髓及一些炎性病变组织的染色中易出现;内源性碱性磷酸酶的作用,特别是肠黏膜上皮和肾近曲小管的刷状缘有高浓度的碱性磷酸酶,若处理不彻底,易出现假阳性结果; 
4) 判断失误,将肿瘤组织中残留的正常组织的免疫组织化学阳性信号误认为是肿瘤的染色反应; 
5) 当肿瘤浸润破坏正常组织时,使被破坏的正常细胞胞浆内的可溶性蛋白释放,后者被肿瘤细胞非特异吸附或吞噬,使瘤细胞出现该种抗原的阳性反应;⑥外源性和内源性色素的干扰。

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