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冷冻保存细胞的解冻与复苏
点击次数:76 发布时间:2019-06-06

冷冻保存细胞的解冻与复苏要点:慢冻快融

(1)快速解冻。冻存细胞液氮中取出后,应立即放入 37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在 1 分钟内全部融化(不要超过 3 分钟)。

(2)解冻操作过程动作要轻。由于冷冻保存过的细胞变得非常脆弱,不仅解冻速度要快,而且动作要轻。一般情况下,解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养(1ml 冻存细胞液加入到 25-30ml 新鲜完全培养液中),24 小时后再用新鲜完全培养替换旧培养液,以去除 DMSO。如果,细胞对冷冻保护剂特别敏感,那么,解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。

特别注意:

(1)解冻时务必注意安全,预防冷冻管爆裂。,要带手套,用镊子将细胞冷冻管从液氮中取出,放入 37℃水浴中。切不可直接用手,以免冻伤。

(2)冷冻管在水浴中解冻时,要将冻存管盖子拧紧,确定拧紧后再投入水浴锅中,注意液面不可超过冻存管盖面,否则,易发生污染。

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